Dosage des protéines par la méthode au BCA

Réactifs

Réactif A : Dissoudre 0.5 g de CuSO₄. 5H₂O et 1 g de citrate de sodium dans 100 mL d'eau. Cette solution est stable indéfiniment (ce n'est pas le cas du mélange sulfate de cuivre et tartrate de la méthode originelle).

Réactif B : Dissoudre 80g de Na₂CO_3, 16 g de NaOH, 16 g de tartrate de sodium (pH ajusté à 11.25 avec du bicarbonate de sodium) dans 1 L d'eau.

Réactif C : Ajouter 1 mL de réactif A à 50 mL de réactif B.

Réactif D : Solution de BCA à 4%

Protocole expérimental

Prélever 0.5 mL de la solution à doser (contenant au maximum 0.05 mg de protéines). Ajouter 2.5 mL de réactif C et 0.25 mL de réactif D. Bien mélanger.Chauffer à 60°C. . Lire l'absorbance entre 600 nm et 750 nm. Réaliser une gamme étalon (0 à 0.05 mg de protéines) avec la serum albumine bovine.

Interférences

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