Dosage des protéines par la méthode du biuret

Réactifs

Dissoudre 1.5 g de CuSO4. 5H2O et 6 g de tartrate double de sodium et de potassium dans 500 mL d'eau. Ajouter 300 mL de NaOH 10% et complèter à 1 L. On peut encore ajouter 1 g de KI et dans ce cas la solution est stable indéfiniment. Conserver dans un flacon en plastique.

Protocole expérimental

Prélever 0.5 mL de l'échantillon à doser (quantité de protéines inférieure à 3 mg) et ajouter 2.5 mL de réactif. Attendre 10 à 30 min. avant de lire l'absorbance à 540 nm.
Réaliser une gamme étalon (0 à 3 mg de protéines) avec la serum albumine bovine.

Pour doser les protéines d'un échantillon turbide (exemple dans une suspension de mitochondries), il faut ajoouter un détergent comme le cholate (0.4% p/v,final) ou le desoxycholate.

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