Dissoudre 100 mg de Coomassie Brillant Blue G-250 dans 50 mL d'éthanol à 95%. Agiter énergiquement pour favoariser la dissolution du colorant. Ajouter ensuite 100 mL d'acide phosphorique à 85% . Ajuster le volume à 1 L avec de l'eau distillée. Filtrer pour éliminer le colrant non dissout. La solution est stable 1 à 2 semaines au froid.
Prélever 0.1 mL de l'échantillon à
doser (contenant au maximum 50 µg de protéines). Ajouter 2.5 mL
de réactif au bleu de Coomassie et lire l'absorbance à 595 nm
après 2 min.
Réaliser une gamme étalon (0 à 50 µg de protéines)
avec la serum albumine bovine.
Les détergents à concentration supérieure à 1% interfèrent avec le dosage. Par contre, le saccharose et les milieux utilisés pour les gradients de densité sont sans effet.