Encapsulation

Réactifs:

Phase aqueuse :

Solution mère d'hexanediamine: 0,5 g d'hexane diamine et 0,4 g de bicarbonate de sodium sont solubilisés dans environ 5 ml d'eau distillée
On ajuste le pH à 9 avec HCI 6M (environ 20 gouttes)
On ajoute 0,35 g de polyvinylpyrrolidone (Povidone) donc le PM est de l'ordre de 30000 (le polymère joue le rôle protecteur).
0,l g de BSA (protéine protectrice)
On ajuste le volume à 1 0 ml avec de l'eau distillée.

Enzyme :

Phosphatase alcaline 10 mg / ml en solution dans Tris 0, 1 M pH 8.2

Phase organique pour émulsion :

Mélange de solvants : cyclohexane : chloroforme 80:20 (v/v) contenant 1 ml d'Arlacel 83 (Sorbitan sesquioléate) : Pour 100 mL, il faut 80 mL de cyclohexane, 20 mL de chloroforme et 1 mL d'Arlcel.

Remarque : Arlacel est un produit très visqueux donc difficile à prélever. Plonger une pipette de 10 mL propre dans le flacon et laisser le liquide monter par capillarité suffisamment pour pouvoir mesurer 1 mL.

Phase organique pour polymérisation

On prélève 15 ml du solvant pour émulsion dans lequel on dissout 85 mg de chlorure de téréphtaloyle. Cette solution est à préparer extemporanement.

Surfactant pour dispersion des microcapsules

Tween 20 à 50% en solution dans du Tris O, l M, pH 9

Tampon Tris 0.1 M, pH 9

Pour 100 mL de solution : Peser, dans un bécher, 1.21 g de Tris base . Ajouter environ 50 mL d'eau distillée et solubiliser soigneusement le produit. Ajuster le pH à 9 en contrôlant la valeur à l'aide d'un pH-mètre avec HCL 1 ou 2 M.

Réactifs pour le dosage enzymatique

Tampon Tris 0.1 M, pH 9

Substrat : 4- Nitrophenylphosphate ou para-Nitrophenylphosphate

4-nitrophénylphosphate de sodium, hexahydrate (pNPP) 5 mM , solution dans l’eau : Dissoudre 18,55 mg de pNPP dans 10 ml d'eau distillée.

NaOH 2 M (pour arrêter la réaction) : Dissoudre 8 g de soude dans 100 mL d'eau distillée.