• En utilisant une cuve remplie du solvant utilisé (éthanol dans le cas présent), on effectue un tracé de ligne de base du spectrophotomètre dans le domaine de longueur d'onde étudié.
• Une fois la ligne de base établie, on enregistre le spectre de l'échantillon vert.

En examinant le spectre d'absorption de l'extrait chlorophyllien, on voit qu'il y a deux zones d'absorption :

• une forte -voire très forte- absorption de la lumière entre 350 nm et 500 nm
• une deuxième zone d'absorption autour de 650 nm.
  
  

En se référant au diagramme des couleurs de la colonne de gauche, on voit que la zone de faible absorption (donc de réflexion des rayonnements) se situe entre 500 et 600 nm soit le domaine des lumière verte et jaune, ce qui correspond bien à la couleur de la solution de l'extrait chlorophyllien.